关于荧光微球选择激发波长和荧光波长的方法


    荧光微球的应用

    中科科优荧光微球粒度均一、单分散性好、稳定性好、发光效率高,微球表面弧度有利于抗原决定簇和抗体结合位点的暴露面处于佳的反应状态,荧光微球能够携带许多荧光分子,较弱的刺激就可以引发较强的信号,所以只需要少量的低能辐射就能产生荧光信号,避免了使用传统的放射性微球造成的辐射危险,并在不损失检测灵敏度的前提下降低了成本。因此在众多领域都具有广泛的应用,如生物化学、生物医药、临床医学、基因分析以及光学仪器等,荧光微球在医药、生物方面的应用尤为重要。


    激发波长和发射波长的区别

    在进行选择之前,需要了解激发波长和发射波长的区别。判断方法不同,激发波长是用某种波长的光激发出荧光,这种波长的光可以是紫外光或者可见光也可以是其他光。发射波长是指某种光发射出来的荧光的波长,一般的可见光的波长用肉眼就能大致判断出来。分辨率不同,激光波长对于杂散光和信噪比的影响非常明显,当狭缝的宽度不变时,用氩激光稍大波长激发样品,杂散光可能会小一些,且分辨率会有所提高。发射光谱是指光源所发出的光谱。当发生连续光谱光源的光通过某一种吸收物质时,通过光谱仪就可以得到吸收光谱。吸收光谱是指在连续发射光谱背景中所呈现出的暗线。用途不同,激发光谱可以分析在不同激发波长下,物质的特定波长荧光的强度变化。荧光激发光谱的形状与发射波长无关。发射光谱是固定激发波的波长,测定发射光强度与波长(有时候也测波数或者频率等)的关系。

    选择激发波长和荧光波长的方法

    激发波长和发射波长是分子荧光光谱测量的重要参数,它的选择影响分子荧光光谱的测量和后续研究的准确性。

    1.先固定发射波长,测定激发光谱;

    2.再固定激发波长,测定发射光谱;

    3.一般选择在较大激发波长和较大发射波长进行物质测定。

    4.可以利用指示克立格法确定激发波长和发射波长。


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